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我司细胞株产品进行实验流程及注意事项
更新时间:2022-04-14   点击次数:1126次

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在做免疫荧光(IF),激光共聚焦(Confocal),凋亡检测(TUNEL)时,免不了要制备细胞爬片,爬片质量*决定了后拍照的质量以及实验数据的精准性。现就如何制备好的细胞爬片介绍。

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细胞株实验操作流程:

1.消化细胞后计数重悬细胞于*培养基中(悬浮细胞直接离心)。

2. 加细胞时,根据玻片的大小,先在每个孔里准备放爬片的位置滴少量培养基,目的是使玻片与培养皿靠培养基的张力粘合到一起,然后放玻片,防止加细胞悬液时玻片漂起,造成双层细胞贴片。整个过程注意无菌操作。

3. 根据自己的需要选择合适的细胞密度种入培养板内即可

保存细胞爬片时,一般用培养皿或避光湿盒,先在皿底放一层面巾纸,然后再放爬片,这样方便做实验时取片。然后盖上盖子,并在盖子上做标记,为避免混淆。一般-20℃保存2-3月的片子去拍照没有问题的。

细胞株进行实验注意事项:

1. 使用细胞爬片时(比如在六孔板中放入爬片,六孔板的孔底面积往往会比爬片面积多出一部分,加细胞悬液时常常就是细胞铺满整个孔底,有时细胞生长边集现象,就是靠近壁边缘密度要高些,这样处于中央玻片上爬的细胞数量就可能相对较少)。比较好的做法是将玻片放入孔板的孔内后,加细胞悬液时只滴到玻片上,一直滴到液体布满整个玻片又不会溢出玻片边缘。

2. 按照实验设计,作用一定时间后取玻片。注意细胞不能太密,否则容易掉片。

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